Image lab软件替代Image j分析WB条带灰度值详细方法

博主最近刚做完苦逼的Western Blot蛋白印迹实验,在使用Image J软件分析条带的时候,发现总是比实际泳道少一个峰,而且在闭合山峰的时候,总感觉主观性因素会让数据不准确,所以求教了实验室学长后,决定使用Image lab这一款工具进行测定灰度值。
Image lab

Image lab

软件名称:Image lab
软件版本:v6.1
来自公司:Bio-Rad
使用环境:win系统
适用人群:生命科学研究人员
体积占用:744M(解压后体积)
软件使用:以下本人将系统讲解使用Image lab分析计算wb蛋白条带灰度值的方法,直接避免image j分析条带出现少一个峰的尴尬。

Image j少一个峰

Image j少一个峰

注意:Image Lab使用前提:该软件只可以兼容打开.gen或.scn格式的图,.tif格式不能识别;请根据曝光仪器型号选用分析软件。
1.打开您的蛋白条带数据文件.gen或.scn格式;

步骤1-打开文件

步骤1-打开文件

2.使用软件左侧的【体积工具】-矩形(其他形状也都可以选用);

步骤2-选择工具

步骤2-选择工具

3.使用矩形选择框,选取需要分析的泳道蛋白为U1;

步骤3-框选蛋白

步骤3-框选蛋白

4.可以使用Ctrl+C和V复制粘贴矩形框U2/U3/U4/U5…依次拖动矩形框选中蛋白;

步骤4-批量框选

步骤4-批量框选

5.如图所示,将每一个蛋白条带完全框选中;

步骤5-选中所有蛋白

步骤5-选中所有蛋白

6.点击软件界面上栏中的【分析表】,即可出现每一个泳道蛋白的灰度值(一般选调整体积值、相对定量值);

步骤6-分析表数据

步骤6-分析表数据

7.点击如图,可以导出数据为excel格式;

步骤7-导出数据文件

步骤7-导出数据文件

8.说明:一般背景暗的话,选调整体积数据;也可选择某一个泳道的条带灰度体积为1,求一组的相对定量值直观比较趋势。
方法:双击该矩形,会出现“体积类型”、“数量”、“参考体积”等选项,打勾“参考体积”,确定。

步骤:求同组的相对定量

步骤:求同组的相对定量

定量数据

定量数据

不同的分析软件都是一个工具而已,蛋白的趋势比较足够用了;quantity one也很好用,爱折腾的朋友不妨一试。
附带软件下载:

Image Lab下载

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